Soluciones de microscopía para la preparación de muestras
Para otros exámenes, como estudios genéticos
Muchas disciplinas, como la biología del desarrollo, la biología molecular, la embriología, la botánica y la neurobiología, funcionan con organismos modelo que a menudo necesitan un manejo o preparación especial antes de hacer más exámenes, como estudios genéticos.
El uso de C. elegans (un nematodo), el pez cebra Danio rerio y la mosca de la fruta Drosophila melanogaster está muy extendido, respectivamente, en laboratorios de gusanos, de peces cebra y de moscas. Estos organismos modelo se deben clasificar, recoger, contar, manipular, diseccionar, fotografiar y monitorizar de forma rutinaria durante sus estadios de desarrollo (p. ej., huevo, embrión, larva...). Los estereomicroscopios o microscopios de disección son herramientas indispensables para estas tareas.
Los organismos modelo pueden ser bacterias, hongos, plantas o animales. Idealmente, los organismos modelo deben presentar ciertas características:
- Comparten muchos genes con los humanos
- Pequeño tamaño y fáciles de criar en el laboratorio
- Rasgos congénitos visibles
- Se dispone del genoma secuenciado
- Fácil manipulación genética
- Genéticamente trazables
- Tiempos de generación y ciclos de vida breves
Ejemplos de organismos modelo comunes
-
Campo de estudio
• Biología del desarrollo
• Biología molecular
• Fisiología
• Farmacología
• Toxicología• Genética
• Biología del desarrollo
• Neurociencia• Embriología
• Biología del desarrollo
• Biología molecular
• Toxicología
• Neurobiología• Embriología
• Biología del desarrollo
• Biología celular
• NeurobiologíaCaracterísticas• Transparentes durante toda su vida
• Tiempo de generación rápido (3 días)
• Fáciles de manipular• Fáciles de criar y mantener
• Tiempo de generación breve (8-14 días)
• 4 pares de cromosomas
• Fáciles de manipular• Comparten el 70 % de los genes con los humanos
• Fáciles de criar
• Transparentes
• Fáciles de manipular• Embriones fácilmente accesibles
• 10 000 ovocitos
• Ovocitos/embriones grandes
• Fáciles de manipular -
Campo de estudio
• Neurobiología
• Genética
• Genómica
• Farmacología
• Investigación clínica• Neurociencia
• Toxicología
• Genética
• Genómica
• Fisiología• Medicina regenerativa
• Biología del desarrollo• Biología del desarrollo
• Biología celular
• Biología molecular
• Genética
• Fisiología vegetalCaracterísticas• Tiempo de generación relativamente corto (~10 semanas)
• 99 % homólogos respecto a los humanos
• Modelo de enfermedad
• Genéticamente trazables
• Fáciles de manipular• Modelo de enfermedad
• Fuente de neuronas primarias
• Órganos más grandesPuede regenerar su(s)
• Cola
• Extremidades
• Partes de su cerebro…• Pequeño genoma
• 5 pares de cromosomas
• Muchos mutantes
• Fáciles de manipular
Requisitos del microscopio
Hay dos tipos de estereomicroscopios, Greenough y objetivo principal común (CMO), cada uno con sus propias características especiales. El tipo CMO proporciona determinadas ventajas respecto al Greenough, en especial en lo que respecta a la iluminación, las capacidades de fluorescencia, la documentación de imágenes digitales y la ergonomía. Sin embargo, los estereomicroscopios Greenough son más compactos, están muy integrados y tienen un precio económico.
Las tareas rutinarias de científicos y técnicos pueden verse beneficiadas por el uso de una vista estereomicroscópica en 3D, combinada con una distancia grande de funcionamiento libre y de características ergonómicas. Estos microscopios son perfectos para la manipulación mecánica, la clasificación y la preparación general de las muestras. Los estereomicroscopios o microscopios de zoom se usan preferentemente para el cribado de fluorescencia de genotipos modificados (por ejemplo, mediante mutaciones mediadas por CRISPR/Cas9) en estudios transgénicos usando marcadores como la proteína de fluorescencia verde (GFP) o roja (RFP). La combinación de un campo de visión amplio con una elevada resolución acelerará este proceso significativamente.
Los microscopios de disección también están muy extendidos en neurociencia, por ejemplo, a la hora de trabajar con animales vertebrados de mayor tamaño, como ratas, que a menudo sirven como fuente de cultivos celulares primarios.