Una nueva luz sobre la ultraestructura
Descubra las técnicas de EM de volumen para la captura de imágenes ultraestructurales en 3D
Las tecnologías y los métodos de la SEM, conocidos en conjunto como EM de volumen (vEM), pueden proporcionar información ultraestructural muy compleja. Los avances científicos, así como las asociaciones y colaboraciones entre la comunidad investigadora y el sector comercial, han conseguido que estos métodos resulten más fáciles de utilizar y más accesibles, incluso para quienes cuentan con poca o ninguna experiencia en el campo de la microscopía electrónica.
La EM de volumen tiene el potencial de impulsar nuevos descubrimientos en neurobiología, investigación sobre el cáncer, biología del desarrollo y ciencias botánicas, entre otros.
Cuando se visualizan imágenes de microscopía electrónica esenciales en investigaciones de ciencias de la vida, se tienen en mente dos tipos diferentes de imágenes. Un tipo retrata los detalles topográficos de las superficies biológicas mediante microscopía electrónica de barrido (SEM), desde granos de polen a cabezas de insectos o bacterias en superficies de tejidos infectados. Otro tipo ofrece una visión bidimensional a partir de secciones finas de tejidos y células, mostrando la ultraestructura de células, orgánulos y complejos macromoleculares. La microscopía electrónica de transmisión (TEM) se utiliza tradicionalmente para este tipo de imágenes en 2D de ultrarresolución y, hasta cierto punto, para la captura de imágenes en 3D de volúmenes relativamente pequeños.
No todo el mundo sabe que las diversas técnicas de SEM también pueden proporcionar información ultraestructural intracelular convincente. Además, el SEM abre la posibilidad de captar imágenes en 3D de volúmenes más grandes, algo que puede ayudar a que los científicos superen las limitaciones experimentales habituales, como el campo de visión limitado y el pequeño tamaño del volumen de la muestra, para comprender mejor los detalles ultraestructurales dentro de un contexto tridimensional más amplio.
A medida que se facilita el uso de estos métodos avanzados de vEM, cada vez más científicos tienen la oportunidad de descubrir partes y procesos de la biología que antes estaban fuera del alcance de cualquier modalidad de captura de imágenes.
La revolución silenciosa de la microscopía electrónica 3D
Póster de Science/AAAS
La vida se desarrolla en tres dimensiones. A pesar de que muchos científicos asocian la microscopía electrónica de barrido (SEM) con la producción de imágenes topográficas fascinantes, también ofrece opciones para exponer la arquitectura celular interna en 3D. Las tecnologías y los métodos de la EM de volumen pueden proporcionar información ultraestructural muy compleja.
Este póster, creado en colaboración entre Science/AAAS y ZEISS, analiza las características principales de los métodos vEM más importantes.
From 3D Light to 3D Electron Microscopy
Libro electrónico de Science/AAAS
En este libro electrónico de 28 páginas de Science/AAAS podrá obtener más información sobre la microscopía electrónica de volumen (vEM) y la microscopía óptica y electrónica correlativa de volumen (vCLEM) para las ciencias de la vida.
Conozca a la comunidad, lea artículos y vea vídeos sobre los flujos de trabajo vEM y vCLEM y encuentre inspiración en un debate de expertos en microscopía electrónica, tanto del mundo académico como de la industria.
Comparación de las técnicas de EM de volumen
Los valores de esta tabla ofrecen una orientación general que permite comparar los métodos en diferentes dimensiones. En función de la implementación y la aplicación del usuario, los valores de comparación pueden variar.
Array Tomography (AT)
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Tomografía de matriz multihaz
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SBF-SEM
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FIB-SEM
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FIB-SEM criogénica
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Tamaño de volumen |
●●●●○○ |
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●●●○○○ |
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Resolución (z) |
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●●●●○○ |
●●●●●○ |
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Velocidad de adquisición1 |
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●●●○○○ |
●●○○○○ |
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Facilidad de uso2 |
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●●●●○○ |
●●●●●● |
●●●○○○ |
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Disponibilidad de instrumentos |
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●●●●○○ |
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Procesamiento de las imágenes3 |
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No destructiva4 |
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Soluciones de ZEISS |
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Contacto ZEISS Microscopy
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Imagen superior: stack 3D de una célula HeLa completa. La célula se sumergió en resina conforme al protocolo de ensayo de verde de malaquita antes de capturar imágenes en un FIB-SEM de ZEISS con un tamaño de vóxel de 5x5x8 nm. Las imágenes de microscopio electrónico fueron adquiridas por Yannick Schwab y Anna Steyer, EMBL, Heidelberg, Alemania. El procesamiento de imágenes basado en software, la reconstrucción y la visualización se realizaron con arivis Vision4D y APEER. Material gráfico: Mica Duran para Science/AAAS