ZEISS Lattice SIM 5
Captura de imágenes en directo con superresolución uniforme en todas las dimensiones espaciales
ZEISS Lattice SIM 5 ha sido optimizado para capturar estructuras subcelulares y su dinámica. Gracias a la tecnología Lattice SIM y al algoritmo de reconstrucción de imágenes de SIM², ZEISS Lattice SIM 5 le ofrece excelentes capacidades de superresolución de hasta 60 nm tanto en células vivas como fijadas. Además, puede elegir el modo de captura de imágenes SIM Apotome y un objetivo de bajo aumento para obtener imágenes generales rápidas de su muestra antes de hacer zoom en los detalles de superresolución.
Capture procesos dinámicos y las estructuras subcelulares más pequeñas
Equipado con el patrón de iluminación ZEISS Lattice SIM y el algoritmo de reconstrucción de imágenes SIM², ZEISS Lattice SIM 5 eleva la microscopía de iluminación estructurada (SIM) a un nuevo nivel. Conseguirá siempre los mejores resultados posibles, incluso si utiliza exposiciones a la luz más bajas para proteger las muestras vivas. Duplique la resolución SIM convencional y discrimine las estructuras subcelulares más pequeñas que tengan una separación de no más de 60 nm. La tecnología Lattice SIM, con eficiencia lumínica, permite capturar con la máxima delicadeza imágenes de muestras vivas y fijadas, proporcionando no solo el doble de resolución espacial en comparación con la SIM clásica, sino también una alta resolución temporal con hasta 255 fps.
Leyenda: Dinámica de la actina en una célula U2OS que expresa LifeAct-GFP captada con el modo Lattice SIM 3D Leap y fases reducidas. Objetivo: Plan-Apochromat 63× / 1,4 aceite
Realice los ajustes que mejor se adapten a las necesidades de sus muestras vivas
La flexibilidad de ZEISS Lattice SIM 5 le permite compensar las necesidades de su experimento priorizando la resolución o la velocidad, o encontrando el equilibrio justo entre ambas. Utilice el presupuesto de fotones para mejorar la resolución lateral por debajo de los 100 nm o reduzca el número de imágenes en bruto necesarias para aumentar la velocidad de adquisición y la delicadeza. ZEISS Lattice SIM 5 cuenta con una serie de opciones para reducir las imágenes en bruto que le permitirán seleccionar los ajustes de adquisición que se mejor adecuen a la resolución espacial y temporal deseada.
Leyenda: Captura de imágenes a cámara rápida del retículo endoplasmático de una célula COS-7 que revela cambios estructurales muy dinámicos. Muestra cortesía del laboratorio Miyawaki, Instituto RIKEN, Japón.
Consiga resultados más fiables en sus experimentos
ZEISS Lattice SIM 5 incluye una excelente supresión de la luz desenfocada, lo cual le proporciona el seccionamiento más nítido de la microscopía de widefield, incluso para muestras con elevada dispersión. La reconstrucción de imágenes de SIM² utiliza una función especial de dispersión de punto de SIM para reconstruir de forma sólida todos los datos de adquisición basados en iluminación estructurada de su ZEISS Lattice SIM 5 con artefactos de imagen mínimos, tanto para muestras vivas como fijadas. Tenga la tranquilidad de estar basando sus conclusiones experimentales en datos reproducibles generados a partir de un algoritmo potente y probado.
Leyenda: Células COS-7 con tinción para microtúbulos (anti-tubulina Alexa Fluor 488, cian) y actina (faloidina Alexa Fluor 561, naranja)
La tecnología detrás de ZEISS Lattice SIM 5
Lattice SIM
La técnica de superresolución en 3D para la captura de imágenes en directo
En Lattice SIM, la muestra se ilumina con un patrón de puntos reticulares, en lugar de líneas de cuadrícula como en la SIM convencional. Debido a su bidimensionalidad intrínseca, el patrón reticular requiere únicamente un reposicionamiento traslacional, pero no una rotación. Esto da lugar a un drástico aumento en la velocidad de captura de imágenes. Adicionalmente, el patrón reticular proporciona un mayor contraste para permitir una reconstrucción más sólida de la imagen. Al duplicarse la eficacia de muestreo en comparación con la SIM clásica, se necesita la mitad de exposición a la luz, lo que convierte a la Lattice SIM en la técnica ideal para la captura de imágenes de células vivas.
Captura de imágenes widefield
La resolución de imagen está limitada físicamente debido al límite de difracción. Además, la calidad de imagen se ve afectada por el desenfoque y la señal de fondo.
Captura de imágenes de la SIM clásica
Para generar frecuencias más altas, se ilumina la muestra con un patrón reticular y se capturan imágenes en diferentes posiciones rotacionales y traslacionales de este patrón. La imagen procesada tiene el doble de resolución en las tres dimensiones.
Captura de imágenes con Lattice SIM
La muestra se ilumina con un patrón de puntos reticulares, en lugar de líneas de cuadrícula. En comparación con la SIM clásica, la eficacia del muestreo es dos veces superior. El patrón reticular proporciona un mayor contraste y es más sólido para el procesamiento.
Imagen reconstruida
Después de la adquisición, se calcula la imagen de superresolución resultante. Con Lattice SIM puede capturar imágenes durante más tiempo con menos blanqueamiento y mantener la calidad de imagen con frecuencias de fotogramas más altas.
Reconstrucción de imágenes de SIM²
Duplique la resolución de SIM
SIM² es un revolucionario algoritmo de reconstrucción de imágenes que aumenta la resolución y la calidad del seccionamiento de los datos de microscopía con iluminación estructurada. SIM² es compatible con todos los modos de captura de imágenes SIM y está completamente integrado en el programa ZEISS ZEN.
A diferencia de los algoritmos de reconstrucción convencionales, SIM² es un algoritmo de reconstrucción de imágenes en dos pasos. En primer lugar se realiza la combinación del orden, la eliminación del ruido y el filtrado de supresión de frecuencias. Todos los efectos resultantes de estas manipulaciones de las imágenes digitales se trasladan a una función de dispersión de punto (PSF) SIM digital. La deconvolución repetitiva subsiguiente usa esta misma PSF. De forma similar a las ventajas del uso de la PSF experimental para la deconvolución de datos de microscopía basados en hardware, el algoritmo SIM² es superior a los métodos convencionales de reconstrucción de imágenes en un paso en términos de resolución, seccionamiento y solidez.
SIM Apotome
Seccionamiento óptico flexible
Elija el modo de adquisición SIM Apotome para obtener imágenes generales rápidas antes de hacer zoom en los detalles de superresolución. SIM Apotome utiliza iluminación estructurada para proporcionarle un seccionamiento óptico rápido de volúmenes grandes con contraste nítido y alta resolución en todas las dimensiones.
SIM Apotome en combinación con el algoritmo de reconstrucción de SIM² le permite ajustar con mayor precisión la delicadeza de la captura rápida de imágenes de células vivas con un elevado contraste y alta resolución. O también puede utilizar la nueva velocidad de seccionamiento óptico para aumentar su productividad al captar áreas grandes de la muestra o volúmenes grandes con diferentes aumentos.
Aumente aún más la velocidad de la captura de imágenes de SIM
Aumente la resolución temporal y la productividad de la captura de imágenes en 2D y 3D mediante los modos de mejora de velocidad.
Modo Burst 2D
Consiga información temporal completa
El procesamiento en modo Burst utiliza el enfoque de ventana deslizante que le permite observar los procesos en sus muestras vivas a una velocidad de hasta 255 fps. El modo Burst es un paso posterior a la adquisición, por lo que le ofrece la flexibilidad necesaria para utilizarlo con conjuntos de datos adquiridos previamente. Usted decide cuánta resolución temporal se necesita para su análisis de datos.
3D Leap Mode
Seccionamiento digital a un nuevo nivel
Para una captura de imágenes rápida y exigente en 3D, el modo de adquisición Leap le permite reducir el tiempo de captura de imágenes y disminuir la exposición a la luz de la muestra. Esto funciona capturando imágenes solo cada tercer plano, para una velocidad de captura de imágenes de volumen tres veces mayor y una exposición a la luz tres veces menor.
Captura simultánea de imágenes en dos colores
Con mucha frecuencia, la investigación de muestras vivas se centra en las interacciones de las diferentes proteínas u orgánulos. La captura simultánea de imágenes de las estructuras implicadas es fundamental para entender correctamente estos procesos tan dinámicos. ZEISS Lattice SIM 5 puede equiparse con dos cámaras en paralelo y llevar a cabo una captura simultánea de imágenes en dos colores dentro de todo su campo de visión.
Descubra los detalles ocultos en las profundidades
Seccionamiento de alta calidad y superresolución en muestras gruesas
El patrón de iluminación de Lattice SIM presenta un mayor contraste y una penetración más profunda de la muestra en comparación con la SIM clásica. Consiga imágenes de superresolución junto con un seccionamiento de alta calidad incluso en muestras gruesas o con dispersión.
Una novedosa tecnología de aclarado e inclusión desarrollada por el Prof. Tang y su equipo (Hsiao et al., Nature Communications 2023), junto con el sólido patrón de iluminación Lattice SIM y la excelente tecnología de reconstrucción de imágenes, permitió capturar imágenes de toda una sección de intestino de ratón de ~200 µm de grosor. Las redes de vasos sanguíneos y nervios pueden visualizarse con gran detalle incluso a esta profundidad.
Observe los detalles más pequeños de la vida
Captura de imágenes en directo a resolución espaciotemporal elevada
ZEISS Lattice SIM 5 combina la captura de imágenes de alta velocidad con una increíble eficiencia lumínica, una baja dosis fotónica y gran sensibilidad. Puede observar estructuras a nivel celular, subcelular e incluso suborganular en especímenes vivos en 2D y 3D con el paso del tiempo.
Las mitocondrias son orgánulos muy dinámicos sometidos constantemente a eventos de fusión y fisión para garantizar una distribución adecuada del ATP en la célula. Para cumplir su función, se sabe que interactúan con muchos otros compartimentos subcelulares, incluidos los microtúbulos, sobre los que se montan para llegar a sus destinos, o el RE, que envuelve a las mitocondrias para constreñir inicialmente su diámetro antes de los eventos de fisión.