ZEISS Apotome 3 Seccionamiento óptico en la captura de imágenes de fluorescencia para su microscopio de widefield
Con la iluminación estructurada, eliminará de forma fácil y eficiente la luz desenfocada. ZEISS Apotome 3 calcula su sección óptica a partir de una serie de imágenes adquiridas con diferentes posiciones de cuadrícula. Obtenga imágenes de mucho contraste, incluso en muestras gruesas, con un sistema tan fácil de manejar como siempre.
Excelentes secciones ópticas
Incluso de muestras gruesas
Apotome 3 aumenta significativamente la resolución axial en comparación con la microscopía de fluorescencia convencional: obtendrá secciones ópticas que permiten el renderizado en 3D, incluso de muestras gruesas. Tres cuadrículas de diferentes geometrías le proporcionan la mejor resolución para cada objetivo. Puede centrarse en su experimento, ya que se selecciona automáticamente la cuadrícula ideal, lo cual siempre da lugar a secciones ópticas con mucho contraste.
Leyenda: larva transgénica de pez cebra. Cortesía de H. Reuter, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
Algoritmos revisados por pares
Enfoques lineales para auténticas secciones ópticas
Las soluciones basadas en software requieren un conocimiento previo de la muestra (métodos basados en IA) o se basan en algoritmos complejos que no han sido revisados por pares. Los usuarios deben confiar en que estas soluciones de caja negra solo generen estructuras que sean reales. ZEISS Apotome 3 utiliza enfoques lineales y algoritmos bien documentados que le permiten calcular secciones ópticas auténticas y fiables.
Leyenda: neuronas corticales (izquierda: widefield; derecha: Apotome 3). Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
Más información estructural
Compare el widefield, el seccionamiento óptico y la deconvolución
Mejore sus imágenes aún más mediante deconvolución usando un algoritmo para la iluminación estructurada. El sistema retiene todos los datos sin procesar y le permite cambiar entre widefield, sección óptica e imágenes sometidas a deconvolución para ofrecer la máxima flexibilidad y la mejor capacidad de comparación. Los algoritmos de deconvolución robustos y fáciles de usar mejoran tanto la resolución lateral como la axial. El contraste mejorado y la supresión del ruido le permiten reconocer mejor las estructuras del objeto examinado.
Leyenda: Neuronas corticales. Cortesía de L. Behrendt, Leibniz-Institute on Aging – Fritz-Lipmann-Institut e.V. (FLI), Alemania.
Libre elección de fuente de luz y colorantes
La decisión es suya, no de la tecnología
Sus experimentos a menudo evolucionan en cuanto a complejidad y requisitos. Por eso necesita un equipo adaptable. Use Apotome 3 con lámparas de haluro metálico, económicos LED de luz blanca o el suave sistema de iluminación multicolor Colibri. Independientemente de si trabaja con DAPI, Alexa488, Rhodamin, Cy5 o con colorantes vitales como GFP o mCherry, Apotome 3 se adapta a sus fluoróforos y a su fuente de luz, creando las imágenes nítidas y claras que busca.
El principio operativo de Apotome 3
Apotome 3 utiliza una cuadrícula para generar un patrón de diferencias de intensidad. Si hay presente luz desenfocada en una determinada región de la muestra, la cuadrícula se vuelve invisible. Tras la adquisición de la fluorescencia de una posición de cuadrícula, la cuadrícula se mueve a la siguiente posición. Se calcula una sección óptica auténtica con mayor contraste y resolución.
Volúmenes de sección óptimos para su muestra
Independientemente del aumento usado, Apotome 3 coloca automáticamente la cuadrícula óptima en la trayectoria del haz.
A: se detecta la emisión de luz desde las áreas desenfocadas. Se reduce el contraste y la resolución. B: la reducción de la fluorescencia de fondo no deseada aumenta con la frecuencia de la cuadrícula. La sección óptica se vuelve más fina. C: se suprime la información de la imagen procedente del exterior del plano focal. Esto mejora el contraste y la resolución de la sección óptica. D: en este ejemplo, «low grid» proporciona el grosor óptimo de la sección. Las imágenes de este tipo son especialmente aptas para análisis en 3D y para el procesamiento con software de renderizado.
ZEISS Apotome 3 en funcionamiento
Ejemplos de aplicación