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Un nouvel éclairage sur l'ultrastructure
Découvrez les techniques de microscopie électronique volumétrique pour l'imagerie ultrastructurelle en 3D
Des informations ultrastructurelles complexes peuvent être fournies par les technologies et méthodes MEB, connues collectivement sous le nom de microscopie électronique volumétrique. Les progrès scientifiques ainsi que les partenariats et les collaborations entre les communautés scientifiques et commerciales ont rendu ces méthodes plus faciles à utiliser et plus accessibles, même avec peu d'expérience ou sans expérience en microscopie électronique.
La microscopie électronique volumétrique promet d'être à l'origine de nouvelles découvertes en neurobiologie, mais aussi dans la recherche sur le cancer, la biologie du développement, la science des plantes, et d'autres domaines encore.
En visualisant la quintessence des images de microscopie électronique dans le cadre de la recherche en sciences de la vie, deux types d'images viennent à l'esprit. Le premier décrit les détails topographiques des surfaces biologiques à l'aide de la microscopie électronique à balayage (MEB), des grains de pollen aux têtes d'insectes en passant par les bactéries à la surface des tissus infectés. Le deuxième permet d'obtenir des informations bidimensionnelles à partir de coupes minces de tissus et de cellules, révélant l'ultrastructure des cellules, des organites et des complexes macromoléculaires. La microscopie électronique à transmission (MET) est traditionnellement utilisée pour ce type d'imagerie 2D à ultra-résolution et, dans une certaine mesure, pour l'imagerie 3D de volumes relativement petits.
La majorité des utilisateurs ignore encore que les différentes techniques de MEB fournissent également des informations ultrastructurelles intracellulaires convaincantes. Le MEB offre par ailleurs des possibilités d'imagerie 3D de volumes plus importants qui permettent aux scientifiques de surmonter les limites expérimentales habituelles, telles que le champ de vision limité et la petite taille des échantillons, afin de mieux comprendre les détails ultrastructurels dans un contexte 3D plus large.
Au fur et à mesure que ces méthodes de microscopie électronique volumétrique deviennent plus faciles à utiliser, un nombre croissant de scientifiques est désormais en mesure de révéler des parties et des processus de la biologie auparavant hors de portée de tout système d'imagerie.
Une révolution silencieuse dans la microscopie électronique en 3D
Poster Science/AAAS

La vie se déroule en trois dimensions. Si de nombreux scientifiques pensent que la microscopie électronique à balayage (MEB) produit des images topographiques captivantes, ils ignorent qu'elle peut exposer l'architecture cellulaire interne en 3D. Des informations ultrastructurelles complexes sont fournies par des technologies et des méthodes de microscopie électronique volumétrique.
Ce poster, créé en collaboration entre Science/AAAS et ZEISS, explore les principales caractéristiques des méthodes de microscopie électronique volumétrique majeures.
From 3D Light to 3D Electron Microscopy
Ebook Science/AAAS

Dans ce nouvel ebook de 28 pages de Science/AAAS, découvrez la microscopie électronique volumétrique et la microscopie électronique et lumineuse corrélative volumétrique (vCLEM) pour les sciences de la vie.
Rencontrez la communauté, lisez des articles et regardez des vidéos sur les flux de tâches en microscopie électronique volumétrique et vCLEM. Laissez-vous inspirer par une discussion en microscopie électronique entre experts issus du monde universitaire et de l'industrie.
Comparaison de techniques de microscopie électronique volumétrique
Les valeurs de ce tableau fournissent des indications générales pour comparer les méthodes selon différentes dimensions. Les valeurs de comparaison peuvent varier en fonction de la mise en œuvre et de l'application de l'utilisateur.
Array Tomography (AT)
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Multibeam AT
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SBF-MEB
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FIB-SEM
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FIB-SEM Cryo
|
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Taille du volume |
●●●●○○ |
●●●●●● |
●●●●●○ |
●●●○○○ |
●●○○○○ |
Résolution (z) |
●●○○○○ |
●●○○○○ |
●●●●○○ |
●●●●●○ |
●●●●●○ |
Vitesse d'acquisition1 |
●●●●○○ |
●●●●●● |
●●●○○○ |
●●○○○○ |
●●○○○○ |
Facilité d'utilisation2 |
●●●●○○ |
●●●●○○ |
●●●●●● |
●●●○○○ |
●○○○○○ |
Disponibilité de l'instrument |
●●●●●● |
●○○○○○ |
●●●●○○ |
●●●○○○ |
●○○○○○ |
Traitement d'image3 |
●●●●○○ |
●○○○○○ |
●●●●●● |
●●●●○○ |
●●○○○○ |
Non destructive4 |
✔ |
✔ |
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Solutions ZEISS |
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1 Hypothèse : comparaison basée sur la même taille de volume.
2 Flux de tâches complet, y compris la manipulation des échantillons.
3 Comprend le traitement des big data.
4 Les coupes peuvent être stockées et réutilisées après l'imagerie.
Contact ZEISS Microscopy
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Image du haut : pile 3D d'une cellule HeLa complète. La cellule a été enrobée dans une résine selon le protocole du vert de malachite avant d'être imagée dans un ZEISS FIB-SEM avec une taille de voxel de 5x5x8 nm. Les images de microscope électronique ont été acquises par Yannick Schwab et Anna Steyer, EMBL, Heidelberg. Le traitement logiciel d'image, la reconstruction et la visualisation ont été réalisés avec arivis Vision4D et APEER. Illustrations : Mica Duran pour Science/AAAS