胚内で核と微小核がセグメント化され、左側には緑色蛍光の生画像、右側には細胞内構造の3D解析が表示されています。
画像解析ワークフロー

詳細な解析と自動化で細胞表現型解析を新たな高みへ

がん研究および細胞生物学における高度な画像解析例

現代の顕微鏡はナノレベルの詳細までイメージングできるため、細胞内構造の表現型解析には最新技術が求められます。細胞生物学やがん研究で直面する課題に関わらず、強力なソフトウェアが信頼性の高い再現性のある結果の取得をレポートします。多様な画像解析タスクに対応するAIベースの自動解析パイプラインを構築することで、研究の問いに答えることができます。

  • 各個の細胞が異なる色で表され、トラッキングラインにより各細胞の移動を時間経過とともに示しています。

    Instance Segmentation(オブジェクトベースのセグメンテーション)を使用して、すべての細胞を個別にセグメント化。高精度のセグメンテーション結果を基に、各細胞の経時変化を忠実に追跡。

    細胞トラッキング

    位相差イメージングに基づいた個別の細胞のセグメント化と追跡により、細胞の運動性を解析

    細胞トラッキングは、タイムラプス画像解析の中でも最も難しいタスクの一つです。これは単一細胞レベルでの解析や、がん細胞の侵入、免疫細胞の移動、胚の発生などの様々な文脈で細胞の運動性を研究するための基礎となります。

  • 黄色、オレンジ色、赤色、青色の様々な色調の96個の長方形で構成されたマトリックスは、96ウェルプレート全体の各ウェルの画像あたりの核の数を示す、核カウント解析の結果を表しています(赤色:多い、青色:少ない)。

    96ウェルプレート全体の各ウェルごとに画像中の核数を示すヒートマップ表示を生成(赤:多い、青:少ない)。

    核カウント

    DAPIなどの蛍光核マーカーを使用したワークフローで核の数をカウント

    核カウントは、生物学的研究における一般的な細胞表現型解析タスクの一つです。多くのアプリケーションや後続の解析において、これを自動化することは非常に重要です。このワークフローは、あらかじめ学習された深層学習モデルに基づいており、1つまたは複数の顕微鏡画像内のDAPIなどの任意の蛍光核マーカーに基づいて、核を自動的にセグメント化し、分離してカウントします。さらに、タイムラプス画像やマルチウェルの計測もサポートしています。出力結果は、各ウェルごとの画像中の核数をタイムポイント(該当する場合)ごとに示したマトリックス形式で提供されます。深層学習モデルは、異なる分解能と倍率を持つ複数の顕微鏡から得られたデータセットでトレーニングされます。

  • 暗青色で表示される各核内に、シアンで核、マゼンタで病巣がハイライトされています。

    各核内でセグメント化された核(シアンのハイライト)とセグメント化された病巣(マゼンタのハイライト)

    ハイコンテント遺伝毒性

    DAPI染色細胞の病巣のシグナル強度を2チャンネルで測定し、DNA損傷レベルを定量化

    DNA損傷の解析はがん研究において重要です。ハイコンテントスクリーニングにより、異なる条件が遺伝毒性に与える影響を効率的にテストできます。

    データ取得後、最初のステップとしてDAPIで染色された核がセグメント化されます。次に、別の核シグナル(赤色シグナル)の輝度測定を基に細胞周期のステージが決定されます。分析パイプラインにおいて親子操作を用いることで、これらの核を細胞内のDNA損傷巣(EdU、緑色シグナル)に基づいて分類することが可能です。このソリューションにより、核を多様なパラメータで迅速かつ柔軟に層別化し、遺伝毒性に関する詳細な機構解析が実施できます。

    ZEISS arivisプラットフォームにセットアップすると、解析結果を3Dで表示でき、数百の試料に対してスケールアップすることも可能です。

  • 核はシアン、オレンジ、赤でマーキングされています。細胞質は緑でマーキングされています。核および細胞質マーカーの組み合わせに基づいて特定の細胞集団が識別されます。

    マルチウェルプレートからの細胞。AIによる自動解析により、赤と緑のマーカーが陽性である細胞を特定。

    表現型スクリーニング

    核、細胞質、膜内の複数の蛍光マーカーの輝度および細胞形態に基づく表現型の特性解析

    表現型スクリーニングは、細胞の表現型の変化をモニターする、ターゲットにとらわれない薬剤探索アプローチです。このアプリケーションは、複雑な細胞モデルにおける様々な細胞内の輝度や形態の測定に関する出力を提供し、マルチウェルプレートでの高スループット定量解析を可能にします。この例では、核マーカーを用いて全細胞を識別し、核および細胞質マーカーの組み合わせに基づき特定の細胞集団が識別されています。また、細胞質マーカーにより、このマーカーを発現する全個々の細胞の形状およびサイズが特性評価されています。

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