体电镜技术
冷冻聚焦离子束扫描电镜
轻松捕捉近原生状态超高分辨率细胞动态快照
典型工作流程示意图
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用聚焦离子束在玻璃化、未染色的样品上切割出沟槽,直到看到感兴趣的结构。
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针对新暴露的样品表面的感兴趣区域结构进行成像。重复进行切割和成像过程,直至完全获得感兴趣区域结构的图像。样品在整个过程中保持玻璃化状态。
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对采集的电镜图像进行处理和对齐形成三维数据集。细胞区室可以被识别和分割。
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可对经过分割的三维数据集进行可视化、研究和统计分析。
应用案例
了解颗石藻中方解石晶体的生物矿化过程
赫氏颗石藻中颗石的形成
方解石颗粒及其超微结构环境实现可视化
使用传统的水基制备方案难以对颗石藻的可溶性无定形钙相超微结构环境进行成像。在冷冻条件下工作的聚焦离子束扫描电子显微镜,可以对接近原生状态的玻璃化海藻进行成像,从而以三维方式揭示超微结构。
赫氏颗石藻细胞被高压冷冻。在成像过程中样品保持冷冻状态;使用蔡司Crossbeam在冷冻条件下采集聚焦离子束扫描电子显微镜数据集。三维重构显示了成熟的颗石藻(黄色),处于初生状态的颗石藻(蓝色)以及脂质体(红色)。