采用Airyscan 2技术的蔡司LSM 980
共聚焦新体验:快速、低光毒性的Multiplex成像
为了在研究生物样品时尽可能减少干扰,您必须对生物模型使用较低的标记密度。这就要求您的成像系统兼具出色的成像性能以及低光毒性和高成像速度。LSM 980共聚焦四维成像平台经过全面优化,能够以更高的光效率对多种弱信号标记同时进行光谱检测。
独特的共聚焦新体验
LSM 980具有多达36个同步通道的高效光路和直至近红外(NIR)范围的全光谱灵活性,可为您的活体样品进行多色实验提供良好的支持。此外,LSM Plus还能让您在实验中得心应手。LSM 980光谱成像具有优良的信噪比与图像分辨率,保证您在活细胞成像实验中可使用低激光强度。
图片说明:Cos-7细胞,使用LSM Plus(包括蔡司近红外探测器)在通道模式下成像。
样品由瑞士苏黎世大学显微镜和图像分析中心(ZMB)的U. Ziegler和J. Doehner提供。
出色的图像灵敏度
与传统LSM探测器相比,Airyscan 2能帮助您完成更多工作。其32个探测器元件中的每一个都能收集更多信息,而所有这些元件组合起来还能采集更多光,从而产生超分辨率的定量结果。您可以通过联合去卷积(jDCV)增加结构信息,进一步提高图像分辨率,或者使用Multiplex模式,同时获得超分辨率信息和10倍以上的速度提升。
图片说明:果蝇卵巢。采用蔡司Airyscan 2,然后通过联合去卷积(jDCV)进行成像。
样品由德国明斯特大学Luschnig工作小组的T. Jacobs和明斯特成像网络的T. Zobel提供
大大提高工作效率
ZEN显微软件可根据您的指令助您一臂之力,以在极短时间内获得可重复的结果。AI样品识别系统(AI Sample Finder)可帮助您快速找到目标区域,使您有更充足的时间来进行实验。智能设置(Smart Setup)助您将出色的成像设置应用于荧光标记。同步数据处理(Direct Processing)功能允许同时进行图像采集和数据处理。无论是在成像期间,还是在后期分享整个实验的过程中,ZEN Connect都可让您随时掌控全局。
高效光路
LSM Plus
共聚焦成像新体验
LSM Plus可以让您在共聚焦实验中得心应手,且不受检测模式或发射范围的限制。其线性维纳滤波器去卷积几乎不需要迭代,同时仍能确保可靠的定量结果。正如我们久经考验的Airyscan超分辨率处理一样,获得的底层光学特性信息将根据物镜、折射率和发射范围自动进行调整。
轻松应用LSM Plus,您可以:
- 获得更高的信噪比 ——高图像采集速度和低激光能量提升信噪比,特别适合低表达水平的活细胞成像
- 获得更高的图像分辨率 ——单次扫描即可获得多达36通道的光谱数据
- 获得更多空间信息 和更高的图像分辨率,让您的强信号样品可选择缩小LSM针孔
- 体验整合的工作流程 ,将LSM Plus与Airyscan超分辨率成像的优势相结合
图片说明:果蝇卵巢,F-肌动蛋白(鬼笔环肽,品红色)和DE-钙粘蛋白(青色)染色。样品由德国明斯特大学Luschnig工作小组的T. Jacobs和明斯特成像网络的T. Zobel提供
Airyscan 2光路原理图
Airyscan 2
超分辨率成像和高灵敏度的结合
面阵列检测器Airyscan 2是一款面阵列探测器,带有32个圆形排列的探测元件。每个探测元件都如同一个小针孔,可以获取超分辨率信息。与标准共聚焦探测器相比,Airyscan整个靶面收集的光更多,从而保证获得更高的光效率以及更多的结构信息。
32张图像意味着更多的信息
Airyscan jDCV强大的去卷积功能
Airyscan探测器32个元件中的每一个获取的样品图像都略有不同,因此可提供实现联合去卷积(jDCV)的其他空间信息。这使得成像时两点之间可分辨的距离(即分辨率)进一步缩小至90 nm。您的超分辨率实验也将受益于单个或多个标记的进一步分离。
“当我们使用Airyscan联合去卷积对内质网和线粒体进行成像并且看到它们非常微小的细节时,我们觉得这实在是太酷了。而且这个新的选配装置能够轻松整合到我们的成像流程中。极快的图像处理速度也带给我们很大的惊喜,让我们在成像时就可以快速做出决定。”
—— Kelly Subramanian博士, 加利福尼亚大学戴维斯分校分子与细胞生物学系博士后学者
Airyscan 2的Multiplex模式
在短时间内获得大观察视野和整个样品的信息
在Multiplex模式下,Airyscan检测器的优势与自适应照明和图像采集形式相结合,为您提供了不同的并行采集选择。Multiplex模式可利用激发激光光斑的形状和单个面阵列探测器元件的位置,在处理并行采集的图像时提取更多空间信息。这使得激光单次可扫描更大的观察视野,从而提高图像采集速度。此外,它可在针孔平面中捕获更多的空间信息,从而使最终的重构图像相比采集样品图像具有更高的分辨率。
蔡司LSM 980的Multiplex模式
LSM 980 |
Airyscan SR |
Multiplex SR-4Y |
Multiplex SR-8Y |
Multiplex CO-8Y |
并行扫描(行) |
1 |
4 |
8 |
8 |
分辨率 |
120/120 |
140/140 |
120/160 |
共聚焦或更佳 |
最大观察视野下的最高扫描速度 |
0.2 (Zoom 1.7) |
1.0 (Zoom 1) |
2.0 (Zoom 1) |
9.6 (Zoom 1) |
抗体标记,细微结构 |
+++++ |
++++ |
+++ |
++ |
抗体标记,拼图 |
++ |
++++ |
++++ |
+++ |
活细胞成像 |
++ |
+++ |
++++ |
+++++ |
近红外(NIR)成像
扩展光谱范围
将光谱范围扩展到近红外可允许您同时使用更多的标记。在您的多色实验中使用更多染料观察更多结构,Quasar和近红外检测器为多重光谱成像提供有效支持。近红外荧光标记波长更长,因此对活体样品具有更低的光毒性,这使得在降低光毒性影响的同时可对活体样品进行更长时间的研究。另外,组织样品对更长波长范围的光线散射率更低,从而增加了穿透深度。
为实现近红外标记的所有优势,双通道近红外检测器采用了两种不同的检测器技术(深红GaAsP和GaAs),即使在高达900 nm的波长下也能拥有出色的灵敏度。
同步光谱成像
快速、灵敏分离所有荧光标记
您可以使用多达36个探测器对完整探测范围进行Lambda扫描,从而分离高度重叠的信号或去除自发荧光,并尽可能降低成像所需的照明和时间。使用LSM Plus还可以改善整个波长范围内的光谱成像,包括在线指纹识别(Online Fingerprinting)。
本示例展示的是小鼠提睾肌成像,使用Hoechst(蓝色)、Prox-1 Alexa488(绿色)、中性粒细胞Ly-GFP、PECAM1 Dylight549(黄色)、SMA Alexa568(橙色)、VEGEF-R3 Alexa594(红色)、血小板Dylight 649(品红色)进行多色标记。使用在线指纹识别(Online Fingerprinting),并通过有32个通道的GaAsP探测器进行采集。
图片说明:LSM Plus处理前后获得改善的信噪比比较。样品由德国明斯特马克斯・普朗克分子生物医学研究所的S. Volkery博士提供
双光子显微技术的能量图
使用LSM 980 NLO进行多光子显微成像
活体或固定样品的无创、深层组织成像
多光子显微技术(双光子、非线性光学(NLO)显微技术)是对活体或固定样品进行无创和深层组织成像的优选方法,尤其是在神经科学领域。多光子显微技术充分利用了较长波长的光子(600 - 1300 nm)被组织吸收和散射较少这一事实,可以深入样品内部并形成焦点。激发荧光染料所需的能量并非由一个光子,而是由两个各带一半能量的光子提供。两个光子同时到达荧光基团的概率只有在焦点处才会足够高。因此发射光都来源于焦平面并能被有效检测,无需针孔即可产生光学切片。
图片说明:双光子显微技术的能量图
荧光相关光谱(FCS)原理。
成像范围外的数据
为您的研究提供更多选项
LSM 980结合了激光点照明技术、线性扫描以及能在光子计数模式下采集信号的检测器,已不仅仅是一个成像设备,还可为您提供:
- 光栅图像相关光谱(RICS)
- 荧光相关光谱(FCS)
- 荧光交叉相关光谱(FCCS)
- 荧光共振能量转移(FRET)
- 荧光漂白后恢复(FRAP)
- 荧光寿命成像显微技术(FLIM)
图片说明:荧光相关光谱(FCS)原理。 荧光颗粒穿过探测体积的轨迹