分子定量工具包（Molecular Quantification Toolkit）

光漂白和光活化实验需要准确定义待处理的细胞器或凝聚物的细胞区室。ZEN分子定量工具包可助您通过手动或自动分析，轻松配置感兴趣区域，并将其分为漂白或对照区域。在共聚焦系统的激光技术支持下，能够以十分有效的波长和强度逐像素定位这些区域。

分子动力学实验涉及复杂的分析，需要整合参考区域、图像或进行指数曲线拟合。该工具包为光操作应用提供向导式分析，如FRAP中一阶或二阶动力学的扩散常数、FRET效率计算的所有典型方法以及灵活的比率分析。此外，它还提供了多种方式以精美呈现可视化结果。

荧光漂白后恢复（FRAP）方法用于研究荧光分子的迁移率。荧光基团在小区域内不可逆地失活。通过附近荧光分子与该区域的交换速率，可以确定扩散速率以及结合和未结合分子的数量。

除标准FRAP外，还有多种相关方法可供使用。反向FRAP（iFRAP）和“光漂白中的荧光损失”（FLIP）有助于确定某一区域（如细胞器）是否与其环境积极交换或孤立；而通过“光漂白后荧光定位”（FLAP），可以精准确定目标分子的空间位置。该工具包支持所有这些方法。

FRET利用了福斯特共振能量转移的物理原理进行测量，即两个非常接近（< 10 nm）的匹配荧光基团之间的能量转移。这一方法揭示了蛋白质动态结合或解离的精准细节。

该工具包为两种主要的FRET方法提供了专门的工作流，其中之一是受体光漂白。在该方法中，感兴趣区域的受体通道经过漂白，导致受体失活，阻止供体进行任何福斯特能量转移。